advansta K-12021-010說(shuō)明書(shū)

WesternBright MCF

一個(gè)試劑盒中的多色熒光蛋白質(zhì)印跡

今天嘗試多色熒光蛋白質(zhì)印跡。我們的試劑盒包括除一抗外的所有物

• 多路復(fù)用 - 同時(shí)可視化兩種蛋白質(zhì)！
• 靈敏度比Cy染料靈敏度高 -10倍; 象形圖檢測(cè)
• 試劑 - 包括AdvanBlock™-PF阻斷劑和AdvanWash/ AdvanWash -IR洗滌劑
• 快速結(jié)果 - 整個(gè)協(xié)議為3.5小時(shí)
• 與檢測(cè)Cy3和Cy5（MCF）或近紅外成像系統(tǒng)（MCF-IR）的成像系統(tǒng)兼容
• 熒光檢測(cè) - 選擇可見(jiàn)光（APC和RPE）或近紅外（IR700和IR800）試劑盒與SpectraDye™二抗

試劑盒包括：
二抗
封閉溶液
洗滌液
預(yù)切低自發(fā)熒光PVDF膜
背景淬火板

描述

WesternBright MCF可見(jiàn)光和近紅外（IR）熒光蛋白質(zhì)印跡試劑盒可同時(shí)測(cè)定兩種蛋白質(zhì)，從而提高單次印跡可獲得的信息質(zhì)量和數(shù)量。

兩種顏色，兩種蛋白質(zhì)，同時(shí)

通過(guò)使用具有不同光譜特性（激發(fā)和發(fā)射）的染料，您可以在數(shù)字成像儀上同時(shí)在不同通道中顯示它們。

圖1.與不同染料結(jié)合的抗體允許您一次可視化兩種抗原。答：該圖表示使用多色熒光的蛋白質(zhì)印跡分析的基礎(chǔ)。是。WesternBright試劑盒中可用的染料的吸收（灰線）和發(fā)射光譜。

也稱(chēng)為多路復(fù)用，使用不同抗體的同時(shí)檢測(cè)對(duì)于某些類(lèi)型的實(shí)驗(yàn)是理想的。例如，與感興趣的蛋白質(zhì)一起測(cè)定加載對(duì)照; 測(cè)定你想要相對(duì)于彼此量化的兩種蛋白質(zhì); 或者，同時(shí)測(cè)定蛋白質(zhì)的磷酸化和非磷酸化同種型。

圖2.使用WesternBright MCF同時(shí)檢測(cè)EGFR和磷酸化EGFR。檢測(cè)到響應(yīng)于EGF的EGFR的磷酸化增加。將來(lái)自A431細(xì)胞（泳道1）和用EGF處理的A431細(xì)胞（泳道2）的裂解物印跡，并在綠色通道（b）中檢測(cè)到EGFR，或在紅色通道（c）中檢測(cè)到磷酸-EGFR。兩個(gè)通道疊加在（a）中。泳道3：分子量標(biāo)記。

WesternBright MCF比其他Cy染料更敏感

WesternBright MCF提供的熒光染料優(yōu)于Cy染料，可檢測(cè)低皮克量的蛋白質(zhì)。

圖3. WesternBright Conjugates提供比ECL Plex Western Blotting系統(tǒng)更明亮的信號(hào)。將含有AFP和CEA蛋白樣品的重復(fù)Western印跡相同地處理，并用小鼠抗AFP和兔抗CEA一抗的相同混合物探測(cè)。根據(jù)推薦用于ECL Plex的方案，一個(gè)印跡用WesternBright綴合物染色，另一個(gè)印跡用相同濃度的Cy3抗小鼠和Cy5抗兔抗體染色。在相同的成像條件下，WesternBright MCF提供更亮的信號(hào)，靈敏度提高10倍。

此外，WesternBright協(xié)議節(jié)省了時(shí)間和金錢(qián)，因?yàn)椴恍枰獎(jiǎng)冸x和重新探測(cè)印跡，不使用一次性膠片，并且印跡可以立即成像，無(wú)需干燥。使用WesternBright多色熒光蛋白質(zhì)印跡試劑盒今天嘗試熒光蛋白質(zhì)印跡。