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技術(shù)文章

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當(dāng)前位置:首頁(yè)技術(shù)文章intronbio LPS提取試劑盒

intronbio LPS提取試劑盒

更新時(shí)間:2019-05-10點(diǎn)擊次數(shù):2036

 

intronbio LPS提取試劑盒

 

LPS Extraction Kit

intronbio 17141100 rxn.

 

產(chǎn)品信息

 

 

描述

能夠分離/純化存在于革蘭氏陰性細(xì)菌外壁中的LPS的產(chǎn)品 

  • •革蘭氏陰性菌中存在LPS分離/純化 
  • •苯酚 - 水型LPS萃取 
  • •有效去除蛋白質(zhì)和核酸等污染物 
  • •有效且易于提取的LPS 
  • •提取LPS的整個(gè)過(guò)程多在60分鐘內(nèi)完成

?LPS提取試劑盒是一種可以分離和純化革蘭氏陰性菌外壁中存在的LPS的產(chǎn)品。通常,革蘭氏陰性細(xì)菌除了在細(xì)胞包膜的外層中的磷脂和蛋白質(zhì)之外還具有稱(chēng)為脂多糖(LPS)的單獨(dú)結(jié)構(gòu)。這些LPS在細(xì)菌生長(zhǎng)和存活中起重要作用,并且已知其發(fā)揮許多作用,尤其是在宿主和寄生蟲(chóng)之間的相互作用中。此外,LPS被理解為與免疫應(yīng)答密切相關(guān),例如當(dāng)施加膿毒性休克時(shí)通過(guò)分泌內(nèi)毒素引起外周血管塌陷,并且對(duì)于毒性病理生理反應(yīng)也是重要的。這種LPS對(duì)每種細(xì)菌具有不同的提取模式,這允許細(xì)菌的系統(tǒng)發(fā)育分離。如前面提到的,細(xì)菌內(nèi)毒素通常存在于革蘭氏陰性細(xì)菌細(xì)胞的外壁上。它不會(huì)在細(xì)菌的生命過(guò)程中表達(dá),但是當(dāng)細(xì)菌生長(zhǎng)或死亡時(shí),細(xì)胞壁被破壞并釋放到外面。天然內(nèi)毒素由LPS,蛋白質(zhì)和磷脂組成。它在自然狀態(tài)下非常穩(wěn)定,強(qiáng)熱,帶負(fù)電,并具有大的分子量(超過(guò)1,000,000道爾頓)。通常,用三氯藝酸,丁醇或EDTA提取蛋白質(zhì)以除去脂質(zhì)相關(guān)蛋白(LAP),并使用苯酚提取磷脂。通常,當(dāng)您嘗試提取LPS時(shí),每細(xì)菌干重可獲得約1-4%的LPS。由于LPS萃取試劑盒基于苯酚水法,

應(yīng)用

  • 01LPS組成和結(jié)構(gòu)的研究 
  • 02細(xì)菌的系統(tǒng)研究 
  • 03抗生素靶向研究 
  • 04LPS抑制藥物設(shè)計(jì)研究 
  • 05碳水化合物抗原免疫反應(yīng)的研究

套件內(nèi)容

內(nèi)容17141(100 Rxn)
裂解緩沖液100毫升x 1 ea
純化緩沖液80毫升x 1 ea

技術(shù)數(shù)據(jù)

LPS提取產(chǎn)率

應(yīng)變LPS產(chǎn)量(μg)蛋白質(zhì)污染*
鼠傷寒沙門(mén)氏菌200~400<0.2μg
腸炎沙門(mén)氏菌90~250<0.2μg
S. gallinarum150~450<0.2μg
大腸桿菌(野生型)220~490<0.2μg
大腸桿菌(O:055)260~510<0.2μg
大腸桿菌(O:111)220~500<0.2μg
大腸桿菌(O:1)180~380<0.2μg
大腸桿菌(O:2)180~380<0.2μg

使用LPS提取試劑盒從OD600的每個(gè)G( - )菌株中提取5個(gè)LPS,并使用Purpald測(cè)定法定量提取的LPS。結(jié)果,證實(shí)了上述提取效率。另一方面,使用我們的SMART™Micro BCA Assay Kit觀察蛋白質(zhì)的存在,確認(rèn)污染程度小于0.2μg。

通過(guò)從各種物種中提取的LPS給出條帶模式

 

泳道1:鼠傷寒沙門(mén)氏菌  泳道2:腸炎沙門(mén)氏菌
泳道3:大腸桿菌(O055)    泳道4:大腸桿菌(O111)
泳道5:S. gallinarium    泳道6:腸炎鏈球菌
泳道7:鼠傷寒沙門(mén)氏菌  泳道8 :大腸桿菌(野生型)
泳道9:大腸桿菌(O111)    泳道10:大腸桿菌(O2)

 

?作為從各種革蘭氏陰性菌提取的LPS的SDS-PAGE后的銀染色的結(jié)果,根據(jù)以多聚體形式存在的LPS的特征和多聚體的數(shù)量觀察到梯型帶圖案,觀察到圖案與眾不同。


 

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