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當前位置:首頁技術(shù)文章kerafast EF1001說明書

kerafast EF1001說明書

更新時間:2020-09-10點擊次數(shù):1705

kerafast EF1001說明書

pCAG-GBP7-p65AD質(zhì)粒

pCAG-GBP7-p65AD質(zhì)粒

 

pCAG-GBP7-p65AD與pCAG-Gal4DBD-GBP2一起用于激活表達GFP的細胞中UAS調(diào)控的基因。該載體允許交換與該載體中GBP7的C-末端融合的激活域(AD)或其他蛋白質(zhì)。

綠色熒光蛋白(GFP)及其衍生物是跨模型生物的基因表達的常用標記。值得注意的是,在小鼠中,已經(jīng)產(chǎn)生了成千上萬個轉(zhuǎn)基因GFP系。這些試劑揭示了許多基因的表達模式,并用作標記特定細胞類型的試劑。為了擴展轉(zhuǎn)基因GFP系的效用,使人們可以使用GFP直接操縱GFP標記的細胞類型中的任何所需基因,我們開發(fā)了一種合成系統(tǒng),該系統(tǒng)使用GFP作為支架蛋白來誘導雜交轉(zhuǎn)錄因子的形成。GFP的識別是由GFP結(jié)合蛋白(GBP)介導的,該蛋白是來源于駱駝科動物抗體的單鏈GFP結(jié)合域。特定的GBP對能夠?qū)⑺┫档腄NA結(jié)合結(jié)構(gòu)域(DBD)和激活結(jié)構(gòu)域(AD)整合到GFP支架上。然后,這種復合物可以觸發(fā)任何由上游激活序列(UAS)調(diào)控的基因的誘導。

 

目錄編號產(chǎn)品尺寸可用性價錢

EF1001

pCAG-GBP7-p65AD質(zhì)粒

斑點在濾紙上1-2周

$ 68.00

 

技術(shù)指標

 

產(chǎn)品類別:質(zhì)粒
基因/插入名稱:GBP7-p65反式激活結(jié)構(gòu)域(AD)融合蛋白
抗生素耐藥性:氨芐西林
格式:液體
經(jīng)測試的應用程序:GFP依賴性轉(zhuǎn)錄因子成分在哺乳動物細胞中的表達。有關(guān)協(xié)議,請參見:Tang JC等。細胞。2013年8月15日; 154(4):928-39。
在37°C的大腸桿菌中生長:是
克隆位點5':年齡
克隆位點3':通知
5'測序引物:GGACTTCCTTTGTCCCAAATCTG
3'測序引物:TAGCCAGAAGTCAGATGCTC
插入尺寸:1017個基點
矢量骨干和大?。?/td>pCAG-GFP,4823
高或低副本:高
發(fā)起人:CAG
存儲:凍干的DNA在室溫下無限期穩(wěn)定,重構(gòu)的DNA短期儲存在4度,長期儲存在-20度。
發(fā)貨:環(huán)境溫度

文獻資料

筆記

pCAG-GBP7-p65AD是哺乳動物表達載體,旨在表達GFP依賴性轉(zhuǎn)錄因子的激活域(AD)部分。具體而言,p65 AD連接到GBP7的C末端。來自SV40大T抗原的核定位信號被添加到融合蛋白的N末端。融合蛋白的轉(zhuǎn)錄由早期CMV增強子/β-肌動蛋白啟動子驅(qū)動,并由兔β-球蛋白聚腺苷酸化信號終止。將Kozak共有序列(GCCACC)直接放在起始ATG的前面,以提高翻譯效率。質(zhì)粒中的氨芐青霉素抗性基因允許在大腸桿菌中進行選擇。SV40 ori序列使質(zhì)粒能夠在表達SV40大T抗原的細胞(例如293T和COS-7細胞)中游離復制。

 

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