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當(dāng)前位置:首頁(yè)技術(shù)文章molecularinstruments雜交鏈反應(yīng)

molecularinstruments雜交鏈反應(yīng)

更新時(shí)間:2020-09-24點(diǎn)擊次數(shù):3577

 

molecularinstruments雜交鏈反應(yīng)(HCR)

HCR放大器可在多種技術(shù)環(huán)境中實(shí)現(xiàn)多路,定量,1步,等溫,無(wú)酶信號(hào)放大。

 

HCR機(jī)制

在2004年,HCR引入了條件核酸自組裝的概念,證明了可以對(duì)核酸分子進(jìn)行改造,使其在混合時(shí)不相互作用,而是僅在暴露于同源引發(fā)劑序列時(shí)才進(jìn)行自組裝。 一個(gè)HCR放大器由兩個(gè)動(dòng)態(tài)捕獲的發(fā)夾h1和h2組成,它們?cè)趯?shí)驗(yàn)室時(shí)間尺度上穩(wěn)定地共存。發(fā)夾h1和h2儲(chǔ)存能量,以在暴露于HCR引發(fā)劑i1時(shí)驅(qū)動(dòng)有條件的自組裝級(jí)聯(lián)反應(yīng)。 引發(fā)劑i1觸發(fā)交替的h1和h2聚合步驟的鏈反應(yīng),導(dǎo)致熒光HCR擴(kuò)增聚合物的生長(zhǎng)。

HCR多路復(fù)用

HCR放大器是可編程的,可使用編程為獨(dú)立運(yùn)行的正交放大器實(shí)現(xiàn)直接的多路復(fù)用。該凝膠展示了通過(guò)4個(gè)正交HCR放大器(B1,B2,B3,B4)進(jìn)行的多路信號(hào)放大。在沒(méi)有引發(fā)劑的情況下,發(fā)夾在其亞穩(wěn)狀態(tài)下表現(xiàn)出小的泄漏。將任何單個(gè)啟動(dòng)器(B1i1,B2i1,B3i1,B4i1)引入放大器混合物中都會(huì)觸發(fā)相應(yīng)的放大器。 

HCR定量

HCR機(jī)制簡(jiǎn)單而強(qiáng)大,無(wú)需使用酶即可提供定量,高增益,1步信號(hào)放大。HCR信號(hào)放大可實(shí)現(xiàn)四種定量分析模式: 

qHCR成像

在解剖學(xué)背景下具有亞細(xì)胞分辨率的模擬RNA相對(duì)定量(例如,整裝脊椎動(dòng)物胚胎)。

?

dHCR成像

在解剖學(xué)背景下(例如厚腦片)以單分子分辨率進(jìn)行數(shù)字RNA定量。

正交HCR放大器

qHCR流式細(xì)胞儀

模擬RNA相對(duì)定量用于哺乳動(dòng)物和細(xì)菌細(xì)胞的高通量表達(dá)譜分析。

?

qHCR Northern印跡

同時(shí)定量RNA靶的大小和豐度。

 

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