描述
單步qRT-PCR試劑盒與Taq Man探針兼容 。該試劑盒提供了一種方便，靈敏且可重現(xiàn)的方法，可通過定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)（qRT-PCR）檢測(cè)和定量RNA分子。使用基因特異性引物，探針和來自總RNA或mRNA的靶RNA，將用于cDNA合成，PCR擴(kuò)增和定量的組分合并在試劑盒中。該套件包含三個(gè)主要組件：RT / HotStar  Taq 混合物，2X反應(yīng)混合物和50 mM硫酸鎂（MgSO 4 ）。RT / HotStar  Taq 混合物包含逆轉(zhuǎn)錄酶（RTase）和HotStar Taq的混合物  DNA聚合酶可實(shí)現(xiàn)最佳cDNA合成和PCR擴(kuò)增。RTase是從莫洛尼鼠白血病病毒（M-MLV）RTase修飾而來，旨在降低RNase H活性并提高熱穩(wěn)定性。HotStar  Taq  DNA聚合酶是 Taq  DNA聚合酶與專有抗體的復(fù)合物，可在環(huán)境溫度下阻斷活性。在95°C的酶激活步驟后恢復(fù)了活性，從而為 PCR中的Taq DNA聚合酶提供了自動(dòng)“熱啟動(dòng)”功能 ，從而提高了PCR反應(yīng)的靈敏度和特異性。2X反應(yīng)混合物由6 mM MgSO 4組成，三磷酸脫氧核糖核苷酸（dNTP）和穩(wěn)定劑提供了專為逆轉(zhuǎn)錄和PCR擴(kuò)增而優(yōu)化的專有緩沖系統(tǒng)。 試劑盒中還包含一根50 mM MgSO 4的添加管。對(duì)于COVID-19檢測(cè)，最佳濃度為4 mM。建議每個(gè)反應(yīng)額外添加0.5μl。