AssayQuant Technologies專注于開發(fā)激酶和磷酸酶的熒光檢測技術(shù)，致力于為生物醫(yī)藥研發(fā)提供高效、精準(zhǔn)的解決方案。公司以PhosphoSens技術(shù)為核心，通過實(shí)時(shí)監(jiān)測酶活性反應(yīng)曲線，突破傳統(tǒng)終點(diǎn)法的局限性，幫助科研人員更深入地理解抑制劑作用機(jī)制。

AssayQuant的產(chǎn)品線覆蓋400余種激酶和磷酸酶檢測試劑盒，以及超30,000種熒光多肽底物，支持從基礎(chǔ)研究到藥物開發(fā)的全流程應(yīng)用。其技術(shù)已在全球范圍內(nèi)被132篇文獻(xiàn)引用，并與多家國際藥企及研究機(jī)構(gòu)建立合作。

作為中國市場的戰(zhàn)略布局，AssayQuant自2022年起授權(quán)上海起發(fā)實(shí)驗(yàn)試劑有限公司為全國一級(jí)代理商，提供本地化技術(shù)支持與服務(wù)。

核心優(yōu)勢

1.PhosphoSens技術(shù)

SOX熒光團(tuán)：尺寸?。ㄅc色氨酸相當(dāng)）、疏水性低，可直接標(biāo)記底物多肽，實(shí)現(xiàn)連續(xù)熒光信號(hào)輸出，避免化合物自身熒光干擾。

動(dòng)態(tài)監(jiān)測：每30秒至2分鐘采集數(shù)據(jù)，實(shí)時(shí)捕捉酶活性變化，支持動(dòng)力學(xué)參數(shù)（如IC50、Ki、kon/koff）計(jì)算。

2.高特異性與生理相關(guān)性

底物基于天然激酶底物序列優(yōu)化，確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果與體內(nèi)環(huán)境高度一致，生化實(shí)驗(yàn)與體內(nèi)研究相關(guān)性優(yōu)異。

3.多功能檢測模式

連續(xù)熒光檢測：兼容常規(guī)熒光酶標(biāo)儀，無需額外設(shè)備。

時(shí)間分辨熒光（TRF）：使用Eu3?替代Mg2?，通過紅移信號(hào)（620nm）消除背景干擾，適用于高靈敏度終點(diǎn)檢測。

4.靈活應(yīng)用場景

支持抑制劑效能評估、激酶組分析、高通量篩選（HTS）、脫靶效應(yīng)研究等，覆蓋腫瘤、免疫、代謝疾病等領(lǐng)域。

主要產(chǎn)品、技術(shù)介紹：

1.ALK [C1156Y]（PhosphoSens Substrate: AQT0101）

AssayQuant 的 PhosphoSens 連續(xù)檢測技術(shù) 采用簡單的 “添加-讀取"操作流程，支持實(shí)時(shí)動(dòng)力學(xué)監(jiān)測，僅需通過熒光強(qiáng)度（FI）測量即可完成。

該技術(shù)通過測量反應(yīng)初始階段（通常為前30-60分鐘）的初始線性區(qū)域斜率，提供高精度和高準(zhǔn)確性的 初始反應(yīng)速率 數(shù)據(jù)，并以每30秒至2分鐘的頻率采集大量數(shù)據(jù)點(diǎn)。

連續(xù)檢測格式 還可通過以下方式校正化合物自熒光干擾：

背景信號(hào)（包含化合物及反應(yīng)體系中除酶外的所有組分）的熒光信號(hào)在反應(yīng)過程中恒定不變；

通過從總熒光信號(hào)（包含酶及所有反應(yīng)組分）中減去背景信號(hào)，即可計(jì)算每個(gè)時(shí)間點(diǎn)的 凈信號(hào)。

該技術(shù)兼容幾乎所有具備 動(dòng)力學(xué)讀板功能 的商用熒光酶標(biāo)儀及實(shí)驗(yàn)室自動(dòng)化設(shè)備，無需終止反應(yīng)或顯色步驟，顯著縮短實(shí)驗(yàn)時(shí)間并提升通量。

2.ABL1(PhosphoSens Substrate: AQT0030)

由于許多化合物庫含有自熒光化合物，AssayQuant 推出了 PhosphoSens Red 檢測試劑盒，該試劑盒允許在更長波長（>600 nm）下進(jìn)行檢測，同時(shí)保持相同的激發(fā)波長最大值，并采用 時(shí)間分辨熒光（TRF） 技術(shù)。

我們建議在激發(fā)光與發(fā)射波長檢測之間設(shè)置 100 微秒延遲，并采用 300 微秒采集時(shí)間，以避免反應(yīng)混合物中熒光材料（具有納秒級(jí)短壽命）的信號(hào)干擾。

反應(yīng)完成后，向每個(gè)孔中加入基于 銪離子（Eu3+） 的試劑，該試劑會(huì)置換螯合復(fù)合物中的 Mg2+。Soc 熒光團(tuán)被激發(fā)后，通過敏化作用增強(qiáng)銪的發(fā)光，產(chǎn)生最大波長為 615 nm（紅色） 的光信號(hào)，可通過標(biāo)準(zhǔn)濾光片進(jìn)行測量。

3.CDC42BPG（PhosphoSens Substrate: AQT0837）

由于許多化合物庫含有自熒光化合物，AssayQuant開發(fā)了PhosphoSens Red檢測技術(shù)，該技術(shù)允許在更長波長（>600 nm）下進(jìn)行檢測，同時(shí)保持相同的激發(fā)波長最大值，并采用時(shí)間分辨熒光（TRF）技術(shù)。

我們建議在激發(fā)光與發(fā)射波長檢測之間設(shè)置100微秒延遲，并采用300微秒采集時(shí)間，以避免反應(yīng)混合物中熒光材料（具有納秒級(jí)短壽命）的信號(hào)污染。

反應(yīng)完成后，向每個(gè)孔中加入基于銪離子（Eu3?）的試劑，該試劑會(huì)置換螯合復(fù)合物中的鎂離子（Mg2?）。Sox熒光團(tuán)的激發(fā)會(huì)敏化銪離子的發(fā)光，產(chǎn)生最大波長為615 nm（紅色）的光信號(hào)，可通過標(biāo)準(zhǔn)濾光片進(jìn)行測量。

目標(biāo)客戶群體

生物醫(yī)藥企業(yè)：小分子激酶抑制劑研發(fā)、臨床前藥效評價(jià)。

科研機(jī)構(gòu)：癌癥、免疫疾病等領(lǐng)域的酶學(xué)機(jī)制研究。

CRO/CDMO：高通量篩選、化合物庫活性評估。

診斷試劑開發(fā)：基于激酶活性的檢測方法學(xué)建立。

常見問題與解答

Q1：PhosphoSens技術(shù)與傳統(tǒng)終點(diǎn)法相比有何優(yōu)勢？

A：傳統(tǒng)終點(diǎn)法僅能獲取單一時(shí)間點(diǎn)數(shù)據(jù)，而PhosphoSens通過連續(xù)監(jiān)測反應(yīng)曲線，可精準(zhǔn)計(jì)算動(dòng)力學(xué)參數(shù)（如IC50、Ki），并區(qū)分可逆/不可逆抑制劑。

Q2：SOX熒光團(tuán)是否兼容常規(guī)熒光酶標(biāo)儀？

A：是的。SOX在485nm激發(fā)/485nm發(fā)射模式下，與主流酶標(biāo)儀（如FlexStation 3、SpectraMax）兼容。

Q3：如何解決化合物自身熒光干擾問題？

A：使用PhosphoSens-Red試劑盒（含Eu3?），通過時(shí)間分辨熒光（延遲100秒讀取620nm信號(hào)）有效規(guī)避干擾。

Q4：是否支持高通量篩選（HTS）？

A：支持。PhosphoSens試劑盒設(shè)計(jì)適配96孔板，可集成至自動(dòng)化液體處理系統(tǒng)，單板通量達(dá)384孔。

Q5：能否定制特殊突變體底物？

A：可以。AssayQuant提供定制化多肽合成服務(wù)，覆蓋野生型及常見突變體（如EGFR T790M、ALK C1156Y）。

Q6：樣品處理對檢測結(jié)果影響大嗎？

A：建議使用低濃度ATP（1-2 mM）模擬生理?xiàng)l件，并避免反復(fù)凍融。具體方案可參考產(chǎn)品說明書或聯(lián)系技術(shù)支持。

Q7：試劑盒的有效期和儲(chǔ)存條件？

A：多數(shù)試劑盒有效期為12個(gè)月，需避光儲(chǔ)存于-20℃。凍干粉需復(fù)溶后48小時(shí)內(nèi)使用。

Q8：如何驗(yàn)證抑制劑的可逆性？

A：采用“跳躍稀釋法"：在高濃度抑制劑（>IC50 25倍）中孵育酶后稀釋，可逆抑制劑活性恢復(fù)，不可逆抑制劑活性維持低位。

Q9：是否提供技術(shù)培訓(xùn)與文獻(xiàn)支持？

A：是的。AssayQuant提供線上/線下操作培訓(xùn)，并可分享同類靶點(diǎn)的成功案例及文獻(xiàn)數(shù)據(jù)。

Q10：支持哪些物種的激酶檢測？

A：目前主要覆蓋人類激酶組，部分試劑盒兼容小鼠、大鼠等模式生物，定制服務(wù)可擴(kuò)展至其他物種。

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