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技術(shù)文章

Technical articles

當前位置:首頁技術(shù)文章CELL BIOLABS公司STA-607(HDL Purification Kit)技術(shù)解答-Cellbiolabs

CELL BIOLABS公司STA-607(HDL Purification Kit)技術(shù)解答-Cellbiolabs

更新時間:2026-03-31點擊次數(shù):130

產(chǎn)品信息

貨號:STA-607

品名:HDL Purification Kit

規(guī)格:10 preps

品牌:CELL BIOLABS


技術(shù)疑問及解答(來源:CELL BIOLABS)

1. 洗滌緩沖液的制備與儲存

手冊中明確要求HDL重懸緩沖液需新鮮制備且不可儲存。對于1×HDL洗滌液,我個人建議每次新鮮配制,但將其置于4°C儲存直至使用是可行的,無需過度擔憂。  

2. PBS配方建議

在此步驟中,您可根據(jù)下游應(yīng)用需求選擇適合的緩沖液進行透析。目前未提及具體PBS配方(如pH、離子強度、是否含Ca2?/Mg2?或防腐劑如疊氮鈉)的強制要求,但需確保其與后續(xù)實驗兼容。  

3. 透析膜選擇

對于貨號Cat# STA-607,透析方案可采用任意透析方法。例如,可使用賽默飛世爾的Slide-A-Lyzer MINI透析裝置。我們通常推薦使用10 kDa截留分子量(MWCO)的透析膜,但其他尺寸也可接受。操作流程需遵循說明書,一般步驟如下:  

• 用300倍樣本體積的緩沖液透析2-4小時;  

• 更換緩沖液,繼續(xù)透析2-4小時;  

• 再次更換緩沖液,過夜透析;  

• 建議在4°C下進行透析以保持樣本穩(wěn)定性。

4. 詳細透析流程

請參考上述第3題的答案(透析時長、緩沖液更換頻率及溫度要求均已涵蓋)。  

5. 透析后樣本情況

• 最終體積:Cat# STA-607的典型產(chǎn)量約為7 ml(來自人血清或血漿樣本);  

• 蛋白濃度范圍:純化后HDL的濃度約為4500 µg/ml。  

6. 透析后樣本處理

需注意,Cat# STA-607提供的溶液并非無菌,因此我們從未對純化后的HDL進行過過濾除菌。理想情況下,純化后的脂蛋白可長期儲存于4°C;若樣本含50%甘油,則可儲存于-20°C。關(guān)于分裝體積,我們無法給出具體建議,需客戶根據(jù)下游應(yīng)用自行決定。  

7. 蛋白濃度測定方法推薦

手冊未明確蛋白濃度測定方法,建議客戶根據(jù)下游應(yīng)用選擇合適方法。我們通常采用BCA assay測定總蛋白濃度。  

8. 總蛋白濃度與HDL濃度的等效性

遺憾的是,我們從未將BCA assay測定的濃度與ELISA結(jié)果進行過比較(僅通過ELISA確認ApoB的存在)。因此,無法提供校正方法或參考標準。關(guān)于殘留的非HDL蛋白,我們通過SDS-PAGE評估純度。  

9. ApoM穩(wěn)定性

很遺憾,我們從未使用Cat# STA-607評估過ApoM的穩(wěn)定性(包括其在硫酸葡聚糖沉淀、離心、重懸、洗滌及透析過程中的結(jié)合情況),也無相關(guān)數(shù)據(jù)證明其未解離。  

10. S1P穩(wěn)定性

同樣,我們從未評估過ApoM或S1P在純化過程中的穩(wěn)定性(如離心、渦旋/重懸、透析等步驟是否會導致S1P與ApoM解離或部分丟失)。  

11. HDL顆粒完整性

該試劑盒旨在維持HDL顆粒的天然結(jié)構(gòu)(包括脂質(zhì)雙層及載脂蛋白組成),但我們從未對其結(jié)構(gòu)或功能進行過驗證(如電子顯微鏡、天然凝膠電泳等數(shù)據(jù))。  

12. ApoM-S1P-HDL的沉淀行為

我們從未評估過ApoM或S1P與HDL的結(jié)合情況,因此無法確定ApoM-S1P-HDL是否會與總HDL共同沉淀,或是否存在選擇性丟失的風險。  

13. 最終產(chǎn)物的組成

按照手冊操作獲得的最終產(chǎn)物是否為“總HDL"?是否包含攜帶ApoM的HDL亞群(即ApoM陽性HDL)?若有,是否有參考數(shù)據(jù)(如文獻或內(nèi)部驗證)說明其在總HDL中的比例?  

很遺憾,我們從未評估過ApoM或S1P的相關(guān)情況,無法回答此問題。此外,關(guān)于純化產(chǎn)物中是否殘留其他脂蛋白(如LDL、VLDL)或血漿蛋白,我們通過SDS-PAGE評估純度。  

14. 直接兼容性

純化后的HDL產(chǎn)物(透析后)是否可直接用于ApoM免疫沉淀?是否需要額外的緩沖液交換或純化步驟(如脫鹽、超濾)?  

很遺憾,我們從未評估過ApoM或S1P的相關(guān)情況,無法給出建議。  

15. 殘留干擾成分

純化后的HDL產(chǎn)物中是否有殘留成分(如硫酸葡聚糖、Tris、沉淀試劑等)可能干擾抗體-抗原結(jié)合?這些殘留是否會影響免疫沉淀效率?  

通過使用硫酸葡聚糖去除液并進行透析,可去除大部分干擾成分。  

16. 抗體推薦

是否有經(jīng)過驗證的ApoM免疫沉淀抗體推薦(如克隆號或目錄號)?關(guān)于抗體濃度、孵育條件或洗脫方法,是否有建議?  

很遺憾,我們從未評估過ApoM或S1P的相關(guān)情況,無法提供推薦。  

17. 產(chǎn)物組成細節(jié)

純化后的HDL產(chǎn)物中已知成分有哪些(如載脂蛋白種類、脂質(zhì)組成、緩沖液成分)?是否有批間一致性數(shù)據(jù)?  

我們通過SDS-PAGE評估純度,但未開展更深入的成分分析或批間一致性研究。  

18. 直接純化產(chǎn)品及技術(shù)服務(wù)

貴公司是否提供直接純化ApoM-S1P-HDL的產(chǎn)品(如ApoM免疫沉淀試劑盒、預偶聯(lián)ApoM抗體 beads/瓊脂糖樹脂或S1P檢測產(chǎn)品)?若沒有直接產(chǎn)品,是否有技術(shù)建議或定制服務(wù)選項用于ApoM-S1P-HDL的純化?  

很遺憾,我們從未評估過ApoM或S1P的相關(guān)情況,也不提供定制服務(wù)。  

希望以上信息能對您有所幫助。若您有任何進一步的問題或疑慮,請隨時與我們聯(lián)系。  


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更多產(chǎn)品信息,請聯(lián)系中國區(qū)域代理商:上海起發(fā)實驗試劑有限公司

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(注:本文內(nèi)容基于品牌公開資料及行業(yè)常規(guī)信息整理,具體以品牌信息文檔為準。)


??熱賣產(chǎn)品

貨號

品名

規(guī)格

品牌

VPK-156

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Beta Hexosaminidase Activity Assay Kit

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Collagen-based Cell Contraction Assay

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QuickTiter™ HIV Lentivirus Quantitation Kit (HIV p24 ELISA)

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Cas9 (CRISPR Associated Protein 9) ELISA Kit

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STA-384

Total Cholesterol Assay Kit (Colorimetric)

192assays

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QuickTiter™ Adenovirus Titer Immunoassay Kit

100 assays

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VPK-120

Retrovirus Rapid Quantitation Kit

20 assays

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ViraDuctin™ AAV Transduction Kit (10T)

10T

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CytoSelect™ 96-well Cell Migration Assay (3 μm), Fluorometric

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CBA-5020

CytoSelect 24-Well Cell Contraction Assay Kit (Floating Matrix Model)

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Lipid Droplet Isolation Kit

50 preps

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STA-320

OxiSelect Oxidative DNA Damage ELISA Kit (8-OHdG Quantitation) (1 plate)

96 assays

CELL BIOLABS

STA-355

OxiSelect™ 96-Well Comet Assay Kit

96assays

CELL BIOLABS

STA-800-5

OxiSelect Intracellular Nitric Oxide (NO) Assay Kit

5 x 96 assays

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VPK-107

QuickTiter Lentivirus Titer Kit (Lentivirus-Associated HIV p24)

96 assays

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AKR-110

Rapid GST Inclusion Body Solubilization and Renaturation Kit

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CELL BIOLABS

CBA-070

CytoSelect™ 48-well Cell Adhesion Assay (ECM Array, Colorimetric)

48assays

CELL BIOLABS

CBA-102

CytoSelect:trademark: 24-Well Cell Migration Assay, 5 µm

12 assays

CELL BIOLABS

CBA-120-5

CytoSelect™ 24-well Wound Healing Assay

5x24assays

CELL BIOLABS

CBA-130

CytoSelect™ 96-well Cell Transformation Assay

96assays

CELL BIOLABS

CBA-230

Cellular Senescence Detection Kit (SA-β-Gal Staining)

50assays

CELL BIOLABS

CBA-5116

Autophagy ELISA Kit (LC3-II Quantitation)

96assays

CELL BIOLABS

MET-5070

Glycine Assay Kit

100assays

CELL BIOLABS

MET-5071

Taurine Assay Kit

200assays

CELL BIOLABS

MET-5093

Alanine Assay Kit

200assays

CELL BIOLABS

MET-5144

Kanamycin ELISA Kit

96 assays

CELL BIOLABS

MET-5151-C

S-Adenosylmethionine (SAM) and S-Adenosylhomocysteine (SAH) ELISA Combo Kit

96assays

CELL BIOLABS

STA-309

Oxidized Protein Immunoblot Control (Carbonyl-BSA)

10ug

CELL BIOLABS

STA-347

OxiSelect™ In Vitro ROS/RNS Assay Kit (Green Fluorescence)

96 assays

CELL BIOLABS

STA-380

Global DNA Methylation ELISA Kit (5’-methyl-2’-deoxycytidine Quantitation)

96assays

CELL BIOLABS

STA-607

HDL Purification Kit

10 preps

CELL BIOLABS

STA-608

LDL/VLDL and HDL Purification Kit (Ultracentrifugation Free)

10preps

CELL BIOLABS

STA-613

Lipid Quantitation Kit (Colorimetric)

100assays

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Total Bile Acid Assay Kit (Colorimetric)

100 assays

CELL BIOLABS

STA-675

Hydroxyproline Assay Kit

96assays

CELL BIOLABS

VPK-107-T

QuickTiter™ Lentivirus Titer Kit (Lentivirus-Associated HIV p24), Trial Size

32 assays

CELL BIOLABS

VPK-111

Rapid RCA Assay Kit

30assays

CELL BIOLABS

VPK-150

QuickTiter™ HBV Core Antigen ELISA Kit

96assays

CELL BIOLABS

VPK-400-DJ

AAV-DJ Helper Free Packaging System

1kit

CELL BIOLABS

VPK-402

AAV-2 Helper Free Packaging System

1kit

CELL BIOLABS

VPK-410

pAAV-MCS Expression Vector

10ug

CELL BIOLABS

AAV-201

ViraDuctin™ AAV Transduction Kit (50T)

50T

CELL BIOLABS

AD-100

293AD Cell Line

1vial

CELL BIOLABS

AKR-103

PhosphoBlocker™ Blocking Reagent

1l

CELL BIOLABS

AKR-104

PhosphoBlocker™ Blocking Reagent

4l

CELL BIOLABS

AKR-130

His-Tag Protein ELISA Kit

96wells

CELL BIOLABS

AKR-171

Nuclear/Cytosolic Fractionation Kit

20preps

CELL BIOLABS

AKR-172

Nuclear/Cytosolic Fractionation Kit

100preps

CELL BIOLABS

AKR-351

Aflatoxin DNA Adduct Competitive ELISA Kit

96 assays

CELL BIOLABS

AKR-5186

Streptavidin ELISA Kit

96assays

CELL BIOLABS

CBA-050

CytoSelect™ 48-well Cell Adhesion Assay (Fibronectin, Colorimetric)

48 assays

CELL BIOLABS

CBA-071

CytoSelect™ 48-Well Cell Adhesion Assay (ECM Array, Fluorometric Format)

48 assays

CELL BIOLABS

CBA-080

CytoSelect™ 24-well Anoikis Assay (Colorimetric/Fluorometric)

24assays

CELL BIOLABS

CBA-100

CytoSelect? 24-well Cell Migration Assay (8 μm), Colorimetric

12assays

CELL BIOLABS

CBA-100-C

CytoSelect™ 24-well Cell Migration and Invasion Assay (8 µm), Colorimetric, Combo Kit

2 x 12 assays

CELL BIOLABS

CBA-105

CytoSelect™ 96-well Cell Migration Assay (5 μm), Fluorometric

96assays

CELL BIOLABS

CBA-106

CytoSelect™ 96-well Cell Migration Assay (8 μm), Fluorometric

96assays

CELL BIOLABS

CBA-110

CytoSelect? 24-well Cell Invasion Assay,

12assays

CELL BIOLABS

CBA-120

CytoSelect™ 24-well Wound Healing Assay

24assays

CELL BIOLABS

CBA-130-5

CytoSelect™ 96-well Cell Transformation Assay

5x96assays

CELL BIOLABS

CBA-135

CytoSelect™ Cell Transformation Assay (Cell Recovery Compatible), Colorimetric

96assays

CELL BIOLABS

CBA-210

CytoSelect™ Leukocyte-Endothelium Adhesion Assay

100assays

CELL BIOLABS

CBA-215

Tumor Endothelium Adhesion Assay

100 assays

CELL BIOLABS

CBA-232

Quantitative Cellular Senescence Assay

10assays

CELL BIOLABS

CBA-312

MEF Feeder Cells (Puromycin-resistant)

1vial

CELL BIOLABS

CBA-5021

CytoSelect™ 48-Well Cell Contraction Assay Kit

48 assays

CELL BIOLABS

LTV-201

ViraDuctin™ Lentivirus Transduction Kit (200 Transductions)

200transductions

CELL BIOLABS

MET-5005

Total Bile Acid Assay Kit (Fluorometric)

100 assays

CELL BIOLABS

MET-5007

Cholic Acid ELISA Kit

96assays

CELL BIOLABS

MET-5014

NAD+/NADH Assay Kit

100assays

CELL BIOLABS

MET-5016

Soluble Collagen Assay Kit

96 assays

CELL BIOLABS

MET-5019

Total Phosphatidic Acid Assay Kit (Fluorometric)

100assays

CELL BIOLABS

MET-5022

Glycogen Assay Kit (Colorimetric)

100assays

CELL BIOLABS

MET-5023

Glycogen Assay Kit (Fluorometric)

100assays

CELL BIOLABS

MET-5028

DAG (Diacylglycerol) Assay Kit

100assays

CELL BIOLABS

MET-5056

Branched Chain Amino Acid Assay Kit

192 assays

CELL BIOLABS

MET-5085

Phospholipid Assay Kit

96 assays

CELL BIOLABS

MET-5090

Adenosine Assay Kit

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CELL BIOLABS

MET-5099

1-Methyladenosine (m1A) ELISA Kit

96assays

CELL BIOLABS

MET-5122

Indole Assay Kit

100assays

CELL BIOLABS

MET-5131

Alpha-Ketoglutarate Assay Kits

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CELL BIOLABS

MET-5133

Formate Assay Kit (Colorimetric)

100 assays

CELL BIOLABS

MET-5136

D-Amino Acid Assay Kit (Colorimetric)

100assays

CELL BIOLABS

MET-5137

D-Amino Acid Assay Kit (Fluorometric)

100assays

CELL BIOLABS

MET-5144

Kanamycin ELISA Kit

96 assays

CELL BIOLABS

MET-5151

S-Adenosylhomocysteine (SAH) ELISA Kit

96 assays

CELL BIOLABS

MET-5152

S-Adenosylmethionine (SAM) ELISA Kit

96assays

CELL BIOLABS

MET-5158

Methionine Assay Kit

100assays

CELL BIOLABS

MET-5165

Glutamine Assay Kit (Fluorometric)

200assays

CELL BIOLABS

MET-5166

Glutamine Assay Kit (Colorimetric)

200assays

CELL BIOLABS

MET-5180

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200assays

CELL BIOLABS

MET-5195

Phenylalanine Assay Kit

100assays

CELL BIOLABS

MET-5209

Homocysteine ELISA Kit

96T

CELL BIOLABS

PRB-5041

Human Ceruloplasmin ELISA Kit

96assays

CELL BIOLABS

RTV-001-PURO

pBABE-Puro Retroviral Expression Vector

10ug

CELL BIOLABS

RTV-040

pMCs-IRES-GFP Retroviral Expression Vector

10ug

CELL BIOLABS

RV-101

Platinum-E (Plat-E) Retroviral Packaging Cell Line

1 vial

CELL BIOLABS

RV-102

Platinum-A Retroviral Packaging Cell Line, Amphotropic

1vial

CELL BIOLABS




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